שם מלא רשמי |
רקומביננטי SARS-CoV-2 Spike RBD Fc כימרה, תאי חרקים שמקורם (rSARS-CoV-2SpikeRBD-Fc, InsectCell) |
סקוונס |
|
חומצות אמינו רצף |
|
שמות נוספים |
|
מספר גישה |
|
GeneID |
|
<br>
סיכום |
SARS-CoV-2, הגורם למגיפה העולמית של נגיף הקורונה 2019 (Covid-19), שייך למשפחה של וירוסים המכונה וירוסים המורכבים בדרך כלל מארבעה חלבונים מבניים: חלבון ספייק(S), חלבון מעטפת (E), חלבון ממברנה (M), וחלבון Nucleocapsid (N). SARS-CoV-2 Spike Protein (S Protein) הוא גליקופרוטאין המתווך היתוך ממברנה וכניסה ויראלית. חלבון S הוא הומטרימרי, כאשר כל מונומר ~180-kDa מורכב משתי יחידות משנה, S1 ו-S2. ב-SARS-CoV-2, כמו ברוב נגיף הקורונה, נדרש פיצול פרוטאוליטי של חלבון S לשני פפטידים נפרדים, S1 ו-S2, לצורך הפעלה. תת-יחידת ה-S1 מתמקדת בהתקשרות של החלבון לקולטן המארח בעוד שתת-יחידת ה-S2 מעורבת בהיתוך תאים. בהתבסס על מחקרים בביולוגיה מבנית, ניתן לכוון את תחום קושרת הקולטנים (RBD), הממוקם באזור ה-C-terminal של S1, במצב למעלה/עומד או למטה/שכיבה. מצב העמידה קשור לפתוגניות גבוהה יותר וגם SARS-CoV-1 וגם MERS יכולים לגשת למצב זה בגלל הגמישות ב-RBD שלהם. מבנה דו-מצבי וגמישות דומים נמצאים ב-SARS-CoV-2 RBD. בהתבסס על הומולוגיה של רצף חומצות אמינו (aa), ליחידת המשנה SARS-CoV-2 S1 RBD יש 73% זהות עם RBD של SARS-CoV-1 S1 RBD, אך רק 22% הומולוגיה עם MERS S1 RBD. ההומולוגיה הנמוכה של רצף aa תואמת את הממצא ש-SARS ו-MERS קושרים קולטנים תאיים שונים. חלבון ה-S של נגיף ה-SARS-CoV-2, כמו המקביל ל-SARS-CoV-1, קושר אנזים 2 הממיר אנגיוטנסין (ACE2), אך עם זיקה גבוהה בהרבה וקינטיקת קישור מהירה יותר. לפני הקישור לקולטן ACE2, ניתוח מבני של טרימר S1 מראה שרק אחד משלושת תחומי ה-RBD במבנה הטרימרי נמצא בקונפורמציה "למעלה". זהו מצב לא יציב וחולף שעובר בין תת-יחידות טרימריות אך הוא בכל זאת מצב חשוף למטרת טיפול בנטרול נוגדנים. נוגדנים פוליקלונאליים ל-RBD של חלבון SARS-CoV-2 הוכחו כמעכבים אינטראקציה עם הקולטן ACE2, מה שמאשר RBD כיעד אטרקטיבי לחיסונים או טיפול אנטי-ויראלי. יש גם עבודה מבטיחה המראה שניתן להשתמש ב-RBD כדי לזהות נוכחות של נוגדנים מנטרלים הנמצאים בזרם הדם של המטופל, בהתאם לחסינות שפותחה לאחר חשיפה לנגיף SARS-CoV-2. לבסוף, הוכח שחלבון S יכול לפלוש לתאי מארח דרך הקולטן CD147/EMMPRIN ולתווך היתוך ממברנה. |
מָקוֹר |
תא חרקים |
משקל מולקולרי |
|
פעילות ביולוגית |
בדיקה בתהליך. |
מראה חיצוני |
אבקה לבנה ליאופיל (מיובש בהקפאה). |
ניסוח |
ליאופיליזציה מתמיסה מרוכזת מסוננת בנפח 0.2 אום ב-PBS, pH 7.0, 5% Trehalose. |
אנדוטוקסין |
פחות מ-0.1 EU/ug של rSARS-CoV-2 Spike RBD-Fc כפי שנקבע בשיטת LAL. |
שחזור |
אנו ממליצים לבצע צנטריפוגה קצרה של הבקבוקון הזה לפני הפתיחה כדי להביא את התוכן לתחתית. מרכיבים מחדש ב-PBS לריכוז של 0.1-1.0 מ"ג/מ"ל. יש לחלק פתרונות מלאי למנות עבודה ולאחסן בטמפרטורה של ≤ -20 מעלות צלזיוס. יש לבצע דילולים נוספים בתמיסות חוסמות מתאימות. |
יציבות ואחסון |
השתמשו במקפיא הפשרה ידנית והימנעו ממחזורי הקפאה-הפשרה חוזרים ונשנים.- 12 חודשים מתאריך הקבלה, -20 עד -70 מעלות צלזיוס כפי שסופק.- חודש אחד, 1 עד 2 מעלות צלזיוס בתנאים סטריליים לאחר ההרכבה.- 8 חודשים, -3 עד -20 מעלות צלזיוס בתנאים סטריליים לאחר בנייה מחדש. |
הפניות |
|
SDS-PAGE |
|
הורד גיליון מידע בטיחותי (SDS). |
לחץ להורדה |
הורדת גיליון נתונים טכני (TDS). |
לחץ להורדה |